原创 小薇 A科研显微镜
可塑性和多样性是巨噬细胞的重要特征,根据其功能不同,巨噬细胞被分为经典活化型即M1 型,替代活化型即M2 型。诱导M1 和M2 型巨噬细胞分化的条件不同,M1 和M2 型巨噬细胞的表型及功能也存在差异。
近几年,巨噬细胞极化是一个关注度比较高的研究热点,近十年有关巨噬细胞极化相关的基金项目统计显示,资助的项目数据和资助的金额持续增加。
Pubmed检索相关发表的文章,文章发表数量也是持续增长,近一年内就有超过4000多篇文章发表,可以看出该主题的关注度。
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今天,小薇来总结下体外诱导巨噬细胞极化的方法都有哪些,我们从以下几点来介绍:
1. 细胞系
Monocytes: 单核细胞
RAW264.7: 小鼠腹腔巨噬细胞
BMDM: bone marrow derived macrophage,骨髓源性巨噬细胞,是常用的原代巨噬细胞
2. 诱导方法
IFN-γ/LPS诱导巨噬细胞M1极化, IL-4/IL-13诱导巨噬细胞M2极化(有同时使用的情况,也有单独使用的情况)
(1)如果是RAW264.7巨噬细胞,直接加LPS/ INF-γ诱导M1极化,加IL4/IL-13诱导M2极化
(2)如果是原始单核细胞或者骨髓祖细胞,需要加入巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF),先诱导其分化为巨噬细胞,然后是M1和M2的表型极化诱导【文献参考PMID: 31775862,IF=12.47】
(3)如果是THP-1单核细胞,比较多见的是用PMA诱导其分化为巨噬细胞,然后是M1和M2表型的极化诱导【文献参考PMID: 31997535,IF=7.45; PMID: 30157903,IF=12.658】
3. 浓度总结
(1)关于IL4和IL-13的浓度
多数文献选择20 ng/mL (PMID: 30157903, PMID: 31775862, PMID: 34993211,PMID: 32204484)
10ng/mL (PMID: 30459152,PMID: 33488991)
50ng/mL (PMID: 34343656)
【同时使用20 ng/mL IL4和IL-13诱导M2表型极化,参考文献PMID: 32204484, IF=6.58】
【单独使用20 ng/mL IL4诱导M2表型极化,参考文献PMID: 34993211,IF=5.06】
(2) 多数情况LPS与INF-γ同时使用,剂量不同文献中都不一样(LPS剂量总高于INF--γ)
100 ng/mL LPS + 50 ng ng/mL INF-γ (PMID: 33488991)
250 ng/mL LPS + 100 ng ng/mL INF-γ (PMID: 34343656)
100 ng/mL LPS + 20 ng ng/mL INF-γ (PMID: 30157903, PMID: 32204484)
(3)LPS单独使用,剂量1 ug/mL (PMID: 34993211)
关于体外诱导巨噬细胞极化的方法,今天就分享到这里了,希望对你有用。关注小薇,一起在科研的道路上前进!
页面更新:2024-03-07
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