民间小议：Direct Biologics宣布其胞外囊泡治疗产品ExoFlo在临床试验中显著提高病人存活率

撰文：王浩

来源：干细胞者说

Direct Biologics是一家专注于细胞外囊泡在疾病治疗中的应用的生物技术公司。医学杂志《胸腔》的2023年6月版上报导了该公司的一项多中心、随机双盲、安慰剂对照的II期临床试验，文章题目是《Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell-Derived Extracellular Vesicle Infusion for the Treatment of Respiratory Failure: From COVID-19》。该前瞻性临床试验在美国的五家医院同时开展，入组了102名新冠肺炎引发的中重度急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者，干预方式是在第1天和第4天分别输注安慰剂、10mL或15mL ExoFlo。总结起来，临床试验结果表明ExoFlo在ARDS成年人患者中取得了良好的安全性数据和显著的疗效结果。在整个研究过程中记录了不良事件。主要结果衡量标准是全因60天死亡率，次要结果包括死亡时间、总死亡率、需接受紧急治疗的严重不良事件发生率、第7、30和60天出院的患者比例、出院时间以及脱离呼吸机的天数。

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临床试验结果总结

在临床试验期间，没有发现与治疗相关的不良事件。所有受试者的总死亡率为61.0%。在分组后分析中，在安慰剂组和ExoFlo-15组中，呼吸衰竭患者的60天死亡率分别为50.0%和19.2%，绝对风险降低30.8%，相对风险降低0.385（95%CI=0.159，0.931；p=0.0340）。对于年龄在18~65岁之间、符合ARDS的修改版柏林的患者群体中，安慰剂组和ExoFlo-15组的60天死亡率分别为72.7%和30.8%，绝对风险降低41.9%，相对风险降低0.423（95%CI=0.173，1.032；p=0.0588）。对于18~65岁年龄组，与安慰剂组相比，ExoFlo-15组的脱离呼吸机天数有所改善，分别为47.6天和30.3天。此外，在这个年龄段的中度和重度ARDS中，脱离呼吸机天数与所用的ExoFlo剂量之间有一定关联性。

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产品情况

ExoFlo是Direct Biologics在研的细胞外囊泡治疗产品，依照cGMP规范从单一供体BM-MSC的培养液中产生。每批次ExoFlo的放行标准包括蛋白质组、信使RNA和microRNA的鉴定、囊泡大小和数量、外泌体中特异性表达的CD9/CD63/CD81等四次跨膜蛋白的图谱。

Direct Biologics的研究表明ExoFlo具备与骨髓间充质干细胞同样的免疫调节特性和再生特性，同时没有细胞治疗的局限，而且ExoFlo不表达可引发急性排斥反应的免疫原性表面表位。用于产生ExoFlo的骨髓间充质干细胞具备国际细胞治疗协会（ISCT）规定的间充质干细胞的典型三系分化能力，表面标志CD90和CD166为阳性，CD45为阴性。这些骨髓间充质干细胞接受了美国FDA评价并在FDA有备案的主文件，包括获批的用于二期临床试验的ExoFlo的CMC资料。其更早完成的一项治疗ARDS患者的安全性临床研究证明了ExoFlo的安全性。

ExoFlo含有1000多种调节性蛋白，其中典型的蛋白列表如下：

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使用剂量

值得关注的是，在该临床试验中的胞外囊泡ExoFlo的使用剂量的计算依据如下：

1. 有24名患者入组的新冠肺炎ExoFlo的研究；

2. 静脉注射骨髓间充质干细胞治疗ARDS的代号为START的一期临床试验，给出的安全剂量高达500万个细胞/公斤体重，最高剂量为1000万个/千克体重；

3. 实验观察到每个间充质干细胞大约分泌2000个胞外囊泡；

4. 实验室分析表明600至800亿个EV/毫升。

从START的一期临床试验干细胞剂量上限推断，静脉注射ExoFlo的上限剂量为17.5毫升/70公斤体重，10毫升和15毫升的静脉注射ExoFlo被确定为合理的低剂量和高剂量组，分别对应着0.9万亿个胞外囊泡和1.2万亿个胞外囊泡。

新冠疫情肆虐期间，中国也完成了几个干细胞外泌体治疗新冠肺炎的小型临床研究：

1.瑞金医院呼吸与危重症医学科瞿介明主任领衔的研究：提取脂肪间充质干细胞外泌体以雾化吸入给药方式治疗7名重症新冠肺炎患者，结果显示患者们很好地耐受了雾化治疗，且所有患者肺部病变均有不同程度的消退，7例患者中有4例较为明显。

2.无锡第五人民医院储美萍主任和无锡市第二人民医院陈义钢主任领衔的研究：使用了脐带间充质干细胞来源的外泌体，以雾化吸入的给药方式对7 例新冠肺炎患者（2名重症、5名轻症））进行了干预，证明外泌体雾化吸入的安全性和初步疗效

这两个临床研究的胞外囊泡/外泌体的使用途径与前述ExoFlo的应用途径完全不同，前者是雾化吸入，后者是静脉输注。哪种使用途径更安全有效，不同途径所采用的胞外囊泡/外泌体的剂量如何调整，将需要更多的临床研究去进一步证明。