学术速览 - 猪源Pdm/09 H1N1甲流NA定点突变拯救毒株的生物特性研究

本期学术速览内容集中在H1N1甲型流感。研究目的利用定点突变技术突变Pdm/09 H1N1流感病毒的NA基因119位点并拯救，研究其生物特性。方法利用重叠PCR的方法进行定点突变，再应用反向遗传学体系中的pBD-NA质粒后在293T细胞中转染拯救流感病毒，通过血凝试验和RT-PCR方法鉴定病毒拯救结果，通过细胞学和攻毒试验研究该位点变异的生物学意义。结果 定点突变测序结果显示，突变的pBD-NA质粒核苷酸第336位由A突变为G,使氨基酸位点发生E(核苷酸：GAA)到G(核苷酸：GGA)的变化，而其他位置的氨基酸均未发生改变。拯救的病毒转染后的细胞悬液接种MDCK细胞连续传代3代后突变毒株(rMT)血凝效价为2~7,亲本毒株(rWT)为2~6。神经氨酸酶的二级结构预测结果显示，rMT与rWT相比，Alpha Helix分值明显下降，均值同比下降约为10.62%,经突变后的rMT Alpha Helix结构分值表现为下降趋势。用rWT和rMT病毒攻毒BABL/c小鼠后第3天的小鼠肺组织、鼻甲骨、脾和肾的病毒滴度，rMT攻毒组均比rWT攻毒组高，鼻甲组织与肺脏中的病毒滴度相比差异不显著，脾和肾的差异显著。结论 NA119位点的定点突变对病毒的复制能力没有明显影响，突变株对BABL/c小鼠的致病力有一定增强，临床症状明显，神经氨酸酶活性下降。

该研究得到国家自然科学基金项目(No.31660713);国家自然科学基金项目(No.31200123)联合资助，相关研究成果以“猪源Pdm/09 H1N1甲流NA定点突变拯救毒株的生物特性研究”为题发表于《中国人兽共患病学报》期刊，并已在知网上线。

—期刊介绍—

《中国人兽共患病学报》是国家科委批准的国家级期刊，由中国微生物学会主办。办刊宗旨：为医学、兽医学专业人员共同交流和探讨同类微生物和寄生虫在人和家畜中感染、发病特点及相互关系的理论，总结和介绍人兽共患病的研究成果和防治经验。读者对象为从事人医和兽医的各级专业人员。为CSCD核心库期刊、中国科技论文统计源期刊、技类核心期刊、国生物医学核心期刊等 并且已被国际权威检索系统CA 、BIOSIS、AJ of Viniti和CAB ABSTRACTS等收录，还被评为第二届国家期刊奖百种重点期刊奖。

—关于JTP—

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